Inainte de efectuare OAT :

Se recomandă 10 ml de urină prima dimineață înainte de mâncare sau băutură. Pacienții trebuie să evite merele, strugurii (inclusiv stafidele), perele, merisoarele și sucurile lor cu 48 de ore înainte de colectarea specimenelor. Evitați suplimentele de arabinogalactan, echinacea, ciuperci reishi și riboză timp de 48 de ore înainte de colectare.

Markeri62-66

 Acid 2-hidroxiizovaleric, acid 2-oxoisovaleric, acid 3-metil-2-oxovaleric, acid 2-hidroizizocaproic și acid 2-oxoisocaproic - Acești metaboliți sunt legați de conversia aminoacizilor cu lanț ramificat (BCAA) în energie în schelet mușchii. Creșteri ușoare pot rezulta din acidoză lactică, cetoză episodică sau deficiențe ale vitaminelor tiamină sau acid lipoic. Creșterile extreme sau multiple pot însemna boala de urină cu sirop de arțar (MSUD). Această tulburare este definită de un deficit al unui complex enzimatic numit alfa-cetoacid dehidrogenază cu lanț ramificat, care este necesar pentru a metaboliza BCAA. Mai jos este o figură pentru a ajuta la vizualizarea căii.

Figura 1: Degradare oxidativă a BCAA leucina, izoleucina și valina. Transaminarea BCAA este catalizată de o aminotransferază cu un singur lanț ramificat (reacția 1). Decarboxilarea oxidativă a BCKA este catalizată de complexul mitocondrial unic lanț ramificat a-cetoacid dehidrogenază (reacția 2). Blocul metabolic la a doua reacție are ca rezultat MSUD.

Marker 67

Acid 2-Oxo-4-metiolbutiric - Acest metabolit poate fi crescut în erorile înnăscute ale metabolismului metioninei; Exemplele includ: deficit de S-adenosilhomocisteină (SAH) hidrolază, deficit de metilenetetrahidrofolat reductază (MTHFRD), deficit de metionină adenosiltransferază și deficit de glicină N-metiltransferază. Dacă este suspectat, testarea genetică este justificată prin intermediul aminoacizilor din plasmă.

Markeri 68-70

Acid mandelic, acid fenilactic și acid fenilpiruvic - Acești metaboliți sunt asociați cu tulburarea genetică fenilcetonurie (PKU), care este cauzată de o deficiență a enzimei tetrahidrobiopterină (sau BH4). În cazurile în care apar creșteri foarte ușoare, aceasta poate fi cauzată de aportul excesiv de fenilalanină (dietă sau suplimentare). Insuficiențele sau deficiențele biopterinei pot fi un alt potențial. Figura 2 este o vizualizare a descompunerii fenilalaninei și tirozinei în legătură cu defectele PKU și biopterină.

Mandelic este, de asemenea, asociat cu PKU, deși nu este prezent pe figură și nu este la fel de bine înțeles. Se crede că este format din acid fenilpiruvic direct în cantități mari. Este un marker care poate dezvălui potențial o expunere la stiren, măsurată la testul GPL TOX, atunci când este crescută, deoarece este generată în metabolismul stirenului.

Figura 2: Căi ale metabolismului fenilalaninei și tirozinei. Defectele enzimatice care cauzează afecțiuni genetice sunt descrise ca bare orizontale care traversează săgeata (reacțiile) de reacție. Căile pentru sinteza cofactorului BH4 sunt prezentate în violet. PKU * se referă la defecte ale metabolismului BH4 care afectează fenilalanina, tirozina și triptofanul hidroxilazele.

* Adaptat de la defectele metabolice ale aminoacizilor. Fenilalanină. 2015.

Marker71

Acid homogentizic - Acidul homogentisic este crescut în tulburarea genetică acidurie homogentizică (cunoscută și sub numele de alcaptonurie). Acidul homogentizic dăunează cartilajului și valvelor cardiace, cu potențialul de a precipita pietre la rinichi și pietre în alte organe. Simptomele apar de obicei după vârsta de 30 de ani, dar urina întunecată (aproape neagră) este evidentă la naștere. Creșteri ușoare pot indica starea purtătoare genetică heterozigotă a bolii.

Marker 72

Acid 4-hidroxifenilactic - Valorile crescute sunt frecvent asociate cu tirozinemii, care pot rezulta din dezvoltarea imatură a sintezei enzimatice la sugari sau deficiențe genetice. Creșteri ușoare pot fi cauzate de aportul crescut de tirozină, metabolismul bacterian al intestinului (specii potențial clostridiene), sindromul intestinului scurt sau afecțiuni hepatice

Marker 73

Acid N-acetilaspartic - Acidul N-acetilaspartic crescut se datorează tulburării genetice a bolii Carnavan, o degenerare spongioasă a creierului care poate cauza o boală fatală.

Marker74

Acid malonic - Asociat cu tulburarea genetică deficit de malonil-CoA decarboxilază sau acidurie malonică cu activitate normală de malonil-CoA decarboxilază. Este puțin probabil ca valorile ușor crescute ale urinei să fie semnificative clinic.

Marker75

Acid 4-hidroxibutiric - Nivelurile foarte ridicate pot indica tulburarea genetică care implică deficit de semialdehidă succinică dehidrogenază. O scădere a acestei enzime duce la o creștere a GABA și GHB, în special în creier și măduva spinării, ducând la o multitudine de tulburări neurologice.

În concluzie, acești metaboliți măsoară funcționalitatea enzimelor asociate cu utilizarea organismului de anumite grupe de aminoacizi, mergând dincolo de digestia și absorbția aminoacizilor. Prin urmare, valorile scăzute nu indică defecte în descompunerea sau absorbția proteinelor, ci mai degrabă deducția este că enzima asociată funcționează bine, deoarece nu există o rezervă a acelui metabolit. Datorită rarității acestor boli genetice, este neobișnuit să vezi creșteri în această secțiune, mai degrabă, este mai frecvent să observi valori scăzute. Având în vedere acest lucru, atunci când apar creșteri în această secțiune, poate fi util să folosiți serviciile de consultații pentru a ajuta la investigarea în continuare a potențialei necesități de testare genetică.

OTA

Ocratoxina A (OTA) este cea mai comună micotoxină care apare la test. Intervalele medii pozitive sunt în general cuprinse între 15-30 nanograme / g de creatinină pentru persoanele suspecte de micotoxine. Rezultatele s-au dovedit a fi mult mai mari în cazuri mai extreme, nivelurile ajungând până la sute și chiar mii.

Toxicologie

OTA este mai ales o nefrotoxină, mai ales că se referă la tubul proximal, care a fost observat în mai multe filuri. De asemenea, poate afecta sistemul imunitar; cu toate acestea, mecanismul exact este variabil între diferite specii. S-au observat studii privind prezența OTA și epuizarea celulelor limfoide și stimularea producției de citokine în special cu IL-2 și IL-5. Alte influențe sunt legate de inhibarea diferitelor enzime, cum ar fi fenilalanina hidroxilaza, fenilalanina-ARNt sintetaza, fosfoenolpiruvatul carboxicinazei renale și carboxipeptidaza A. De asemenea, OTA poate îmbunătăți peroxidarea lipidelor, care este un alt aspect al leziunilor celulare cauzate de această micotoxină. De asemenea, are potențialul de a provoca proliferarea celulei prin interferența cu semnalizarea hormonală Ca2 + și, prin urmare, de a afecta homeostazia Ca2 + AMPc.

Proprietăți

Structural, OTA constă dintr-o grupare para-clorofenolică, care conține o porțiune dihidroizocumarină, care este legată de L-fenilalanină printr-o legătură amidică. La un pH neutru, OTA este ușor solubil în apă și solubil în solvenți organici polari. Odată ce apar condiții alcaline, devine solubil în toate soluțiile apoase. Punctul său de topire este cuprins între 90 ° C (194 ° F) și 169 ° C (336,2 ° F), în funcție de solvent, dovedind o stabilitate ridicată în special în procesarea alimentelor.

Metabolism

Este absorbit în sistem, pe cale orală, cutanată sau prin inhalare. Din punct de vedere al ingestiei, OTA este absorbită în tractul GI prin diferite puncte. Luând act de faptul că grupul hidroxil al OTA este mai mult sub formă neionizată la pH scăzut, ceea ce îmbunătățește absorbția acestuia, prin urmare o cantitate semnificativă de OTA este absorbită în stomac. De asemenea, este ușor absorbit în intestine prin difuzie pasivă, care este ajutat de legarea OTA de albumina serică. Acest complex crește, de asemenea, timpul de înjumătățire cu o singură doză de OTA care durează aproximativ 35 de zile. Se crede că această capacitate de legare este cea care permite OTA să se transfere din sânge în lapte.

Corpul uman încearcă să elimine unele OTA prin bilă, cu toate acestea reciclarea enterohepatică face acest lucru mai puțin eficient. Odată ajuns în ficat, microsomii citocromului P-450 împreună cu NADPH metabolizează OTA în continuare în hidroxiochratoxină A pentru eliminare. OTA în sine este excretată în principal prin urină, totuși sistemul de transport al anionului organic în tubulii proximal și distal al rinichiului reabsorbe activ OTA. În acest moment, OTA este transportat cu proteine ​​purtătoare mai mici, care permit compusului să treacă prin membrana glomerulară la o rată crescută. Acest lucru crește și mai mult bioacumularea și contribuie la timpul de înjumătățire prelungit, ducând la cauza nefrotoxicității care rezultă cu expuneri consistente, mai mari.

Acidul micofenolic (MPA) este una dintre micotoxinele mai bine înțelese din comunitatea medicală, deoarece este utilizat de industria farmaceutică. Intervalul mediu pozitiv tinde să fie între cincizeci și mijlocul sutelor. În cazuri mai extreme, poate fi în mii. Dacă cineva ia medicamentul care conține MPA, cantitatea excretată tinde să fie între 40.000-100.000 nanograme / g de creatinină.

Toxicologie

Principalul mecanism de acțiune pentru MPA este ca un inhibitor al inozinei monofosfat dehidrogenazei, ceea ce duce la o inhibare a căii de novo a sintezei nucleozidelor de guanozină. Acest lucru reduce semnificativ limfocitele T și B, deoarece acestea sunt dependente de sinteza de novo a purinelor pentru proliferarea lor.

Proprietăți

MPA este un compus polichidic, care nu este solubil în apă și are un punct de topire în jur de 141 ° C (285 ° F). Similar cu OTA, are o afinitate mare pentru albumina. Când albumina este în cantități mai mici din cauza unei boli sau a unei stări inflamatorii, concentrația de MPA liberă poate crește. MPA este metabolizat prin glucuronidare prin glucuronil transferază, în principal în ficat, dar și în intestine și rinichi. Aceasta formează în cele din urmă glucuronid MPA (MPAG). Acest metabolit are o activitate redusă asupra sistemului imunitar, cu toate acestea celălalt metabolit care se formează, acil glucuronidul, va avea un impact asupra sistemului imunitar, similar cu MPA. La analiza metabolismului MPA la pacienții cu transplant stabil, 28% din MPA administrat oral a fost transformat în MPAG, iar raportul MPA: MPAG: acil glucuronid a fost de aproximativ 1: 24: 0,28.

Metabolism

MPA, așa cum se observă prin administrare orală, este absorbit în intestinul subțire și eliminat în principal în urină prin secreție tubulară activă și filtrare glomerulară, cu aproximativ 60% sau mai mult ca MPAG și aproximativ 3% ca MPA. Rețineți aici că MPAG are un impact mai mic asupra sistemului imunitar față de MPA, astfel încât măsurarea ar avea o semnificație clinică mai mică, deoarece se referă la evaluarea toxicității. MPAG folosește, de asemenea, bila în eliminarea sa, totuși poate fi deconjugată de anumite flori din intestin înapoi la MPA, ceea ce duce la reabsorbția acesteia. Unele enzime implicate în glucoronidarea MPA (în special UGT1A8 și UGT1A9), sunt exprimate în afara ficatului, contribuind astfel la metabolismul din tractul GI. Timpul de înjumătățire al MPA este între 8-16 ore, prin urmare, atunci când apar creșteri extreme, este probabil ca urmare a unei expuneri foarte recente.

Cunoscută anterior ca F-2, Zearalenona (ZEA) este o altă micotoxină care are o cantitate mare de recunoaștere. Este un contaminant foarte comun al cerealelor până la punctul în care este reglementat îndeaproape de numeroase țări. Ceea ce îl deosebește de alte micotoxine este că are o aplicație unică în reglarea hormonilor la animale datorită efectelor sale estrogenice. Acest medicament farmaceutic se numește zeranol și este aprobat pentru a fi utilizat la animale în SUA, deși FDA a interzis-o pentru uz uman. Trebuie remarcat aici că Agenția Mondială Antidoping urmărește zeranolul din 2003 la sportivi (care consumă de obicei un număr semnificativ de produse de la animale) și a găsit doar 6 teste pozitive la nivel global. Intervalele tipice găsite pe panoul GPL MyCoTOX tind să fie sub 20 și, în cazuri mai extreme, pot crește cu sute sau mai mult.

Toxicologie

Principalul mecanism de acțiune al ZEA este activarea receptorilor estrogeni, creând răspunsuri estrogenice. Prin urmare, este clasificat ca un disruptor endocrin. Impactul ZEA asupra efectelor estrogenice variază semnificativ în funcție de speciile de animale. Porcii tind să fie cei mai sensibili la acesta, în timp ce oamenii necesită o expunere mai cronică pentru a fi semnificativ dăunători. Efectele în cascadă au fost identificate în organul uterin și în țesutul mamar, cum ar fi creșterea estradiolului. ZEA are, de asemenea, capacitatea de a acționa asupra hipotalamusului și a hipofizei, imitând efectele estrogenice. Există o discuție despre asocierea sa cu hepatotoxicitatea și imunotoxicitatea, dar acestea nu sunt la fel de bine înțelese.

Proprietăți

MPA este un compus polichidic, care nu este solubil în apă și are un punct de topire în jur de 141 ° C (285 ° F). Similar cu OTA, are o afinitate mare pentru albumina. Când albumina este în cantități mai mici din cauza unei boli sau a unei stări inflamatorii, concentrația de MPA liberă poate crește. MPA este metabolizat prin glucuronidare prin glucuronil transferază, în principal în ficat, dar și în intestine și rinichi. Aceasta formează în cele din urmă glucuronid MPA (MPAG). Acest metabolit are o activitate redusă asupra sistemului imunitar, cu toate acestea celălalt metabolit care se formează, acil glucuronidul, va avea un impact asupra sistemului imunitar, similar cu MPA. La analiza metabolismului MPA la pacienții cu transplant stabil, 28% din MPA administrat oral a fost transformat în MPAG, iar raportul MPA: MPAG: acil glucuronid a fost de aproximativ 1: 24: 0,28.

Metabolism

MPA, așa cum se observă prin administrare orală, este absorbit în intestinul subțire și eliminat în principal în urină prin secreție tubulară activă și filtrare glomerulară, cu aproximativ 60% sau mai mult ca MPAG și aproximativ 3% ca MPA. Rețineți aici că MPAG are un impact mai mic asupra sistemului imunitar față de MPA, astfel încât măsurarea ar avea o semnificație clinică mai mică, deoarece se referă la evaluarea toxicității. MPAG folosește, de asemenea, bila în eliminarea sa, totuși poate fi deconjugată de anumite flori din intestin înapoi la MPA, ceea ce duce la reabsorbția acesteia. Unele enzime implicate în glucoronidarea MPA (în special UGT1A8 și UGT1A9), sunt exprimate în afara ficatului, contribuind astfel la metabolismul din tractul GI. Timpul de înjumătățire al MPA este între 8-16 ore, prin urmare, atunci când apar creșteri extreme, este probabil ca urmare a unei expuneri foarte recente.

Citrinina (CTN) este probabil a doua micotoxină cea mai frecventă raportată, dar, din păcate, are cea mai mică recunoaștere din literatură. Este foarte obișnuit să se găsească alături de OTA, mai ales că de obicei provin din aceeași specie (Aspergillus niger). Intervalele generale găsite pentru rezultate pozitive sunt sub o sută.

Toxicologie

Mecanismul de acțiune pentru toxicitatea CTN nu este la fel de bine înțeles ca celelalte micotoxine. S-a constatat că provoacă stres oxidativ și permeabilitate crescută a membranelor mitocondriale, însă nu membranele celulare în sine. În aceste preparate mitocondriale, CTN a inhibat succinat oxidaza și NADH oxidaza, în timp ce, de asemenea, inhibă complet respirația celulară. Organul țintă pare a fi rinichiul într-o varietate de filume. Embriocide, fetotoxice și genotoxice au fost suspectate și dovedite în unele organisme. Imunotoxicitatea și hepatotoxicitatea sunt, de asemenea, un potențial, dar datele lipsesc. Atunci când CTN și OTA sunt împreună în cadrul sistemului, acestea lucrează în cooperare la reducerea activității sintezei ARN în țesutul renal.

Proprietăți

CTN este o micotoxină polichidică insolubilă în apă rece, abia solubilă în apă fierbinte și solubilă în solvenți organici polari. Se poate descompune în soluții acide și alcaline. Punctul de topire al CIT este de aproximativ 100 ° C (212 ° F). Comparativ cu alte micotoxine, CTN este destul de sensibil la căldură și instabil la creșteri de temperatură. Când este încălzit (> 175 ° C, în condiții de uscare,> 100 ° C în apă), are potențialul de a se degrada în CIT H1, care este mai toxic, și CIT H2, care este mai puțin toxic decât CTN. De asemenea, are un timp de înjumătățire scurt în sângele uman (~ 9 ore) și în urină (6-8 ore) și, din acest motiv, se crede că nu se bioacumulează în organisme decât dacă există expuneri repetate și mari.